電鏡固定液(2.5%,電鏡專用)由戊二醛組成部分、磷酸鹽更多的合作機會、去離子水等組成,pH7.2~7.4規定,該固定液對細胞核有所提升、細胞漿的細微結(jié)構(gòu)固定效果好建設,經(jīng)常用于電鏡標本的固定競爭力。 使用說明:
組織:組織取材后一分鐘內(nèi)必須進入戊二醛調整推進,取材部位一定要準確狀況,大小盡量控制1個立方毫米以內(nèi)或更小。取完材后放4℃固定4小時以上.送檢機製。運輸2-8℃保存全過程。
貼壁細胞:培養(yǎng)好的細胞倒掉培養(yǎng)基迅速加入預(yù)冷的電鏡固定液,細胞刮快速刮下細胞后轉(zhuǎn)移至15ml離心管內(nèi)(勿用胰酶)探討,轉(zhuǎn)速500-800rpm離心5min(成團細胞大小為綠豆大小為宜)不負眾望,成團,隨后去除大部分上清液(留1ml左右)調解製度,轉(zhuǎn)至1.5離心管中精準調控,靜止自然沉降1h(2-8℃),去上清創新內容,再加入1ml新鮮電鏡固定液放2-8℃固定保存機遇與挑戰。
懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至15ml離心管內(nèi)離心廣泛關註,轉(zhuǎn)速800-1000rpm善於監督,離心5min成團(成團細胞大小為綠豆大小為宜),隨后去除大部分上清(留1ml)就能壓製,轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管中更合理,靜止自然沉降1h(2-8℃),去上清更優美,再加入1ml新鮮電鏡固定液放2-8℃固定保存各方面。
電鏡固定液保存條件:
4°C保存,一年有效操作說明將取出的組織切成1mm3大小成效與經驗,然后用牙簽或鑷子將組織塊移至盛有冷的固定液的小瓶中在4°C條件下固定2-4h適應性。如果組織帶有較多的血液和組織液,應(yīng)先用固定液洗幾遍稍有不慎,然后再切成小塊固定重要作用。如不能一次性切成1mm3的大小也可以先切成稍微大點的組織塊,然后邊固定邊修成1mm3大小的最為顯著。
注意事項:
1.戊二醛滲透性較差尤為突出,所以取材要控制在1個立方毫米左右。
2.取完材后盡快放入電鏡固定液中自行開發。
3.加入固定液的組織放2-8℃固定保存進行部署。
保存條件:2-8℃避光保存,1年有效應用情況。
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