細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)
活體細(xì)胞通常都具有一定的遷移能力更多可能性，不同細(xì)胞的遷移能力不同提供有力支撐。與遷移相類似的能力是侵襲，具有裂解細(xì)胞基質(zhì)的能力的細(xì)胞通常具有較強(qiáng)的侵襲能力同期。大部分腫瘤細(xì)胞的遷移能力較強(qiáng)生產效率，這也是反應(yīng)腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)移的一個(gè)重要指標(biāo)。通常會(huì)先對(duì)細(xì)胞的遷移能力進(jìn)行檢測(cè)效果，進(jìn)一步再觀察該細(xì)胞是否具有侵襲能力使用。在進(jìn)行遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)過程中，我們會(huì)選擇多種方法在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)密度增加。綜合判斷某種細(xì)胞的遷移和侵襲能力有效性。
細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)步驟
一、將小室放入培養(yǎng)板中機遇與挑戰，在上室加入300 ?l預(yù)溫的無血清培養(yǎng)基廣泛關註，室溫下靜置15－30 min，使基質(zhì)膠再水化集成技術。再吸去剩余培養(yǎng)液就能壓製。
二、制備細(xì)胞懸液
三適應能力、接種細(xì)胞
測(cè)量外泌體的粒徑分布一直以來都是外泌體表征的重要組成部分更優美。但是由于外泌體的尺寸僅為30~200 nm，所以必須借助一些特殊的檢測(cè)手段才能夠?qū)@種在光學(xué)顯微鏡下不可視的顆粒進(jìn)行觀測(cè)防控。本篇就外泌體粒徑測(cè)量技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行簡(jiǎn)述成效與經驗，并對(duì)不同技術(shù)的差異進(jìn)行比較。
在外泌體發(fā)現(xiàn)的早期堅實基礎，由于還沒有專門針對(duì)這類尺寸顆粒的分析方法傳遞，因此直接在電鏡下面觀察粒徑并統(tǒng)計(jì)成為了最早的外泌體粒徑統(tǒng)計(jì)方法。
由于外泌體與材料學(xué)所合成的脂質(zhì)體在形態(tài)上十分相似深入闡釋，因此用于脂質(zhì)體表征的動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)（DLS）便被應(yīng)用于外泌體的尺寸測(cè)量上。DLS利用光射到遠(yuǎn)小于其波長(zhǎng)的小顆粒上時(shí)會(huì)產(chǎn)生瑞利散射現(xiàn)象，通過觀察散射光的強(qiáng)度隨時(shí)間的變化推算出溶液中顆粒的大小物聯與互聯。但是這種技術(shù)會(huì)受到測(cè)量物質(zhì)的顏色穩定、電性、磁性等理化特性的影響供給，并且對(duì)于灰塵和雜質(zhì)十分敏感品質。因此使得DLS在測(cè)量尺寸較小的粒子時(shí)，測(cè)量出的粒徑與實(shí)際的分布具有較大的偏差深入各系統。
為了彌補(bǔ)DLS的短板解決問題，納米粒子跟蹤分析（NTA）技術(shù)孕育而生。這種技術(shù)采用激光散射顯微成像技術(shù)作用，用于記錄納米粒子在溶液中的布朗運(yùn)動(dòng)軌跡相互配合，并通過Stokes-Einstein方程推算粒子大小。這種技術(shù)能夠?qū)?0~1000 nm的粒徑進(jìn)行測(cè)量著力增加，因此能夠提供更為精確的粒徑數(shù)據(jù)智能化。在諸多文獻(xiàn)的測(cè)試中均取得了較DLS更好的精度，因此成為目前最為主流的外泌體尺寸測(cè)量手段處理。
