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小動物活體成像

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

小動物活體成像技術(shù)是在不損傷動物的前提下對其進(jìn)行長期縱向研究的技術(shù)之一。成像技術(shù)可以提供的數(shù)據(jù)有精確定量和相對定量兩種創造。

  小動物活體成像技術(shù)是在不損傷動物的前提下對其進(jìn)行長期縱向研究的技術(shù)之一。成像技術(shù)可以提供的數(shù)據(jù)有精確定量和相對定量兩種連日來。在樣本中位置而改變快速融入,這類技術(shù)提供的為精確定量信息,如CT系統、MRI和PET提供的為精確定量信息增強;圖像數(shù)據(jù)信號為樣本位置依賴性的,如可見光成像中的生物發(fā)光交流等、熒光更加廣闊、多光子顯微鏡技術(shù)屬于相對定量范疇,但可以通過嚴(yán)格設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)來定量提高。其中可見光成像和核素成像特別適合研究分子可以使用、代謝和生理學(xué)事件,稱為功能成像堅實基礎;超聲成像和CT則適合于解剖學(xué)成像稍有不慎,稱為結(jié)構(gòu)成像,MRI介于兩者之間等地。

  動物模型是現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究中重要的實(shí)驗(yàn)方法與手段最為顯著,有助于更方便、更有效地認(rèn)識人類疾病的發(fā)生規定、發(fā)展規(guī)律和研究防治措施環境,同時大鼠、天竺鼠高質量、小鼠等小動物由于諸多優(yōu)勢在生命科學(xué)優勢與挑戰、醫(yī)學(xué)研究及藥物開發(fā)等多個領(lǐng)域應(yīng)用日益增多。近年來各種影像技術(shù)在動物研究中發(fā)揮著越來越重要的作用解決方案,涌現(xiàn)出各種小動物成像的專業(yè)設(shè)備,為科學(xué)研究提供了強(qiáng)有力的工具有力扭轉。
  動物活體成像技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法上高質量,對活體狀態(tài)下的生物過程進(jìn)行組織、細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究的技術(shù)廣度和深度。動物活體成像技術(shù)主要分為光學(xué)成像 (optical imaging)深入交流、核素成像(PET/SPECT)、核磁共振成像(magnetic resonance imaging 加強宣傳,MRI)臺上與臺下、計(jì)算機(jī)斷層攝影(computed tomography用的舒心,CT)成像和超聲(ultrasound)成像五大類。
  1 可見光成像
  體內(nèi)可見光成像包括生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)[2]集聚效應。生物發(fā)光是用熒光素酶基因標(biāo)記DNA集成,利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應(yīng)底物發(fā)生生化反應(yīng)產(chǎn)生生物體內(nèi)的光信號;而熒光技術(shù)則采用熒光報告基因(GFP互動講、RFP)或熒光染料(包括熒光量子點(diǎn))等新型納米標(biāo)記材料進(jìn)行標(biāo)記穩定性,利用報告基因產(chǎn)生的生物發(fā)光、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的生物光源過程中。前者是動物體內(nèi)的自發(fā)熒光去突破,不需要激發(fā)光源,而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)達到。
  1.1 生物發(fā)光:哺乳動物生物發(fā)光作用,一般是將螢火蟲熒光素酶(Firefly luciferase)基因整合到需觀察細(xì)胞的染色體DNA上,以表達(dá)熒光素酶行業分類,培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株技術特點,當(dāng)細(xì)胞分裂、轉(zhuǎn)移數據顯示、分化時高質量,熒光素酶也會得到持續(xù)穩(wěn)定的表達(dá)[4]。標(biāo)記后的熒光素酶只有在活細(xì)胞內(nèi)才會產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象記得牢,并且發(fā)光強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目呈線性相關(guān)註入了新的力量。
  除螢火蟲熒光素酶外,有時也會用到海腎熒光素酶(renilla Luciferase)[5]更多可能性。二者的底物不一樣去創新,螢火蟲熒光素酶的底物是熒光素(D-luciferin),海腎熒光素酶的底物是腔腸素(coelentarizine)緊迫性。二者的發(fā)光波長不一樣結構,前者所發(fā)的光波長在540~600nm,后者所發(fā)的光波長在460~540nm左右高效。前者所發(fā)的光更容易透過組織溝通協調,在體內(nèi)的代謝較后者慢,而且特異性好體系。所以保障性,大部分活體實(shí)驗(yàn)使用螢火蟲熒光素酶基因作為報告基因,如果需要雙標(biāo)記或特殊的實(shí)驗(yàn)責任製,也可采用后者作為備選方案十分落實。
  新問世的PpyRed紅色漂移熒光素酶,把以前的熒光素酶的發(fā)光峰從562nm漂移到612 nm。隨著發(fā)光波長的增加製造業,PpyRed紅色漂移熒光素酶穿透性大大提高優化服務策略,被皮膚吸收的比例顯著降低,且光的漫射現(xiàn)象減少發展基礎,提高了分辨率兩個角度入手。總的說來顯示,PpyRed紅色漂移熒光素酶提高了活體生物發(fā)光成像的靈敏度和分辨率創新為先。
  對于細(xì)菌標(biāo)記,一般利用發(fā)光酶基因操縱子luxABCDE或luxCDABE集聚,其由控制的編碼熒光素酶的基因和編碼熒光素酶底物合成酶的基因組成競爭力。利用這種辦法進(jìn)行標(biāo)記的細(xì)菌會持續(xù)發(fā)光,不需要外源性底物狀況。但是一般細(xì)菌標(biāo)記需要轉(zhuǎn)座子的幫助把外源基因插入到細(xì)菌染色體內(nèi)穩(wěn)定表達(dá)機製性梗阻。通過熒光素酶基因標(biāo)記的細(xì)菌進(jìn)行的胃腸道排空的實(shí)驗(yàn)可以把活體成像的研究應(yīng)用擴(kuò)展到藥物動力學(xué)、胃腸道功能學(xué)等領(lǐng)域全過程。
  1.2熒光:熒光成像技術(shù)發(fā)展迅速集成應用,主要表現(xiàn)在成像探針的不斷更新;光學(xué)成像系統(tǒng)不僅提供定量信息不負眾望,還能提供三維立體圖像和多項(xiàng)復(fù)雜的數(shù)據(jù)高效流通;紅外線斷層掃描重建、光譜分離精準調控、圖像融合和多通道成像技術(shù)已經(jīng)在許多成像系統(tǒng)常規(guī)應(yīng)用功能。
  隨著小動物成像技術(shù)的發(fā)展,成像探針種類越來越多解決,功能越來越強(qiáng)大預期。量子點(diǎn)(quantum dots,QDs)熒光標(biāo)記是納米技術(shù)和體內(nèi)熒光成像技術(shù)結(jié)合的一種新技術(shù)幅度,除了能對活細(xì)胞實(shí)時長時間動態(tài)熒光觀察與成像結構,對細(xì)胞間、細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞器間的各種相互作用的原位實(shí)時動態(tài)示蹤外貢獻,還可以標(biāo)記在其他需要研究的物質(zhì)上規模最大,如藥物、特定的生物分子等統籌,示蹤其活動及作用最深厚的底氣,其在長時間生命活動監(jiān)測及活體示蹤方面具有*的應(yīng)用優(yōu)勢。
  小動物活體成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)超高靈敏度的發(fā)光成像
  Xtreme采用高靈敏度的CCD相機(jī)堅實基礎,該相機(jī)的最小檢測光子數(shù)<50photons>95%(峰值),不僅能夠進(jìn)行深層腫瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移位點(diǎn)的生物發(fā)光檢測等地,還能進(jìn)行微弱髓過氧化物酶(MPO)活性檢測,檢測炎癥的發(fā)生和發(fā)展以及cherenkov成像最為顯著。
  熒光光源,全波段熒光染料應(yīng)用Bruker Xtreme系統(tǒng)多模式成像系統(tǒng)具備市場上*的最佳的熒光成像模塊,整個模塊圍繞優(yōu)質(zhì)的信噪比進(jìn)行設(shè)計(jì)規定。
  ( 1 )1600萬像素超高分辨率CCD環境,極大提高圖像的質(zhì)量;
  (2) 400W氬燈光源——發(fā)光效率高的氤燈光源,增加信號檢測深度;穩(wěn)定連續(xù)的全波段光譜責任,*泛的熒光應(yīng)用;
  (3)發(fā)射濾光片一—具有去除光暈的效果應用情況,提高圖像信噪比;
  (4)多張濾光片的配置——熒光染料任您選擇;(5)光場校正功能——整個激發(fā)光場均勻化,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不受動物放置位置影響;
  (6)高通量成像——5只小鼠同時成像組建,適合高通量實(shí)驗(yàn)表現。


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