細胞活力檢測

更新時間：2024-09-26

簡要描述：

細胞活力檢測
tunel細胞凋亡檢測服務利用脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）將脫氧核糖核苷酸-熒光素偶聯物標記到DNA缺口的3'-末端。試劑盒提供實驗所需的全套試劑組分以及優(yōu)化的實驗方案規模，檢測方便發展需要，且適用于熒光酶標儀特性、熒光顯微鏡積極性、流式細胞儀。熒光信號易于被檢測（Ex/Em = 555nm/565 nm）支撐作用。

　　MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide多種方式，化學名稱： 3-(4對外開放，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽邁出了重要的一步，商品名：噻唑藍有序推進。是一種黃顏色的染料。MTT比色法需求，是一種檢測細胞存活和生長的方法堅定不移。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能更讓我明白了。在一定細胞數范圍內迎難而上，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚探索，用酶聯免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值堅持先行，可間接反映活細胞數量。

　　細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3‘-OH末端滿意度，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下優化上下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶模樣、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3’-末端生產體系，從而可進行凋亡細胞的檢測。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂很重要，因而沒有3'-OH形成能力和水平，很少能夠被染色。所以通過TUNEL法異常狀況，即基因片段末端標記（Fragment End Labeling, FragEL）從而可進行凋亡細胞的檢測研究。

　　TUNEL法細胞凋亡檢測試劑盒 (橙紅熒光) 利用脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）將脫氧核糖核苷酸-熒光素偶聯物標記到DNA缺口的3'-末端。試劑盒提供實驗所需的全套試劑組分以及優(yōu)化的實驗方案應用創新，檢測方便提高，且適用于熒光酶標儀、熒光顯微鏡的特性、流式細胞儀交流。熒光信號易于被檢測（Ex/Em = 555nm/565 nm）。

　　細胞活力檢測操作步驟

　　1.收集對數期細胞共同，調整細胞懸液濃度推進一步，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度1000- 10000 /孔經過。

　　2.一定條件培養(yǎng)細胞適當時間，至細胞單層鋪滿96孔平底板,加入濃度梯度的藥物力度。

　　3.適當條件培養(yǎng)適當時間明確了方向，倒置顯微鏡下觀察。

　　4.每孔加入10ul MTT溶液勇探新路，繼續(xù)培養(yǎng)1-4h單產提升。若藥物與MTT能夠反應，可先離心后棄去培養(yǎng)液試驗，小心用PBS沖2-3遍后勞動精神，再加入含MTT的培養(yǎng)液。

　　5.終止培養(yǎng)製度保障，小心吸去孔內培養(yǎng)液預下達。

　　6.每孔加入100ul二甲基亞砜，置搖床上低速振蕩10min統籌推進，使結晶物充分溶解方案。在酶聯免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。

　　活力計算：

　　細胞活力（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0加藥）-A（空白）]×100

　　A（加藥）：具有細胞的必然要求、MTT溶液和藥物溶液的孔的吸光度

　　A（空白）：具有培養(yǎng)基和MTT溶液而沒有細胞的孔的吸光度

　　A（0加藥）：具有細胞研究成果、MTT溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度

　　細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力

　　tunel細胞凋亡檢測服務應用范圍

　　1.抗腫瘤藥物篩選

　　2.細胞毒性試驗

　　3.腫瘤放射敏感性測定

　　細胞活力檢測服務期限

　　1-2周。

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